凍存細胞到貨處理 1、收到細胞后，檢查外包裝情況和箱內是否還有干冰。如有外包裝破損干冰已揮發(fā)等 問(wèn)題，請即時(shí)聯(lián)系。 2、將細胞取出轉移至液氮或－80 度冰箱保存，建議盡早復蘇。 3、復蘇第一管如有活性狀態(tài)問(wèn)題及時(shí)與我們聯(lián)系，會(huì )有技術(shù)人員與您溝通指導后再復蘇第 二管。特別說(shuō)明：未與我方聯(lián)系擅自復蘇第二管出現問(wèn)題不予售后。 細胞復蘇 1、 從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無(wú)結晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁； 2、將凍存管中的細胞移至含 5ml 培養基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min； 3、棄上清，沉淀用 5ml 培養基重懸，接種 T25 培養瓶，于 37℃,5%CO2 細胞培養箱中 培養； 4、第二天，換用新鮮培養基繼續培養。 細胞傳代 1、細胞生長(cháng)至覆蓋培養瓶的 80%面積時(shí)，棄 T25 培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細胞一次： 2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后 加入 5ml 培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至 15ml 離心管 中，1000rpm 離心 5min； 3、棄上清，沉淀細胞用 1-2ml 培養基重懸，然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè) T25）， 補充新的培養基至 5-8ml/瓶，最后放入 37℃,5%CO2 細胞培養箱中培養； 細胞凍存 1、細胞生長(cháng)至覆蓋培養瓶的 80%面積時(shí)，棄 T25 培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細胞一次； 2、添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后 加入 5ml 培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至 15ml 離心管 中，1000rpm 離心 5min； 3、 棄上清，沉淀細胞加入 1ml/支的富衡無(wú)血清凍存液（FH7001），混勻后加入凍存管中。 （如：凍一支，加入 1ml 無(wú)血清凍存液） 4、 將凍存細胞直接放入－80℃冰箱即可；如后期要將細胞轉入液氮罐中，需在-80℃冰箱 存放 24 小時(shí)以上。 本庫的細胞系（株）僅用于科研工作